អ្នកស្រាវជ្រាវជនជាតិហូឡង់រួមបញ្ចូលគ្នានូវ CRISPR និង bioluminescence នៅក្នុងការធ្វើតេស្តពិសោធន៍សម្រាប់ជំងឺឆ្លង

យោងតាមក្រុមអ្នកស្រាវជ្រាវនៅប្រទេសហូឡង់ បានឱ្យដឹងថា ប្រូតេអ៊ីនពេលយប់ដែលទើបនឹងបង្កើតថ្មីអាចបង្កើនល្បឿន និងសម្រួលដល់ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យនៃជំងឺមេរោគ។
ការសិក្សារបស់ពួកគេដែលត្រូវបានបោះពុម្ពផ្សាយកាលពីថ្ងៃពុធនៅក្នុង ACS Publications ពិពណ៌នាអំពីវិធីសាស្រ្តមួយជំហានដ៏រសើបសម្រាប់ការវិភាគយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីករបស់មេរោគ និងរូបរាងរបស់ពួកគេដោយប្រើប្រូតេអ៊ីនពណ៌ខៀវ ឬពណ៌បៃតងភ្លឺ។
ការកំណត់អត្តសញ្ញាណធាតុបង្កជំងឺដោយការរកឃើញស្នាមម្រាមដៃអាស៊ីត nucleic របស់ពួកគេគឺជាយុទ្ធសាស្ត្រសំខាន់ក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យគ្លីនិក ការស្រាវជ្រាវជីវវេជ្ជសាស្ត្រ និងការត្រួតពិនិត្យសុវត្ថិភាពចំណីអាហារ និងបរិស្ថាន។ការធ្វើតេស្តប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់វត្ថុធាតុ polymerase (PCR) ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយគឺមានភាពរសើបខ្លាំង ប៉ុន្តែទាមទារឱ្យមានការរៀបចំគំរូ ឬ ការបកស្រាយលទ្ធផលដ៏ស្មុគ្រស្មាញ ដែលធ្វើឱ្យពួកវាមិនអាចអនុវត្តបានសម្រាប់ការកំណត់ការថែទាំសុខភាពមួយចំនួន ឬការកំណត់ធនធានមានកម្រិត។
ក្រុមនេះមកពីប្រទេសហូឡង់ គឺជាលទ្ធផលនៃកិច្ចសហការរវាងអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រមកពីសាកលវិទ្យាល័យ និងមន្ទីរពេទ្យ ដើម្បីបង្កើតវិធីសាស្ត្រវិនិច្ឆ័យអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកលឿន ចល័ត និងងាយស្រួលប្រើ ដែលអាចអនុវត្តបានក្នុងការកំណត់ផ្សេងៗគ្នា។
ពួកវាត្រូវបានបំផុសគំនិតដោយពន្លឺភ្លើង ពន្លឺរបស់សត្វរុយ និងផ្កាយតូចៗនៃ phytoplankton ក្នុងទឹក ដែលទាំងអស់ត្រូវបានបំពាក់ដោយបាតុភូតហៅថា bioluminescence ។ឥទ្ធិពល​ពន្លឺ​ក្នុង​ភាព​ងងឹត​នេះ​គឺ​បណ្តាល​មក​ពី​ប្រតិកម្ម​គីមី​ដែល​ទាក់ទង​នឹង​ប្រូតេអ៊ីន Luciferase ។អ្នកវិទ្យាសាស្ត្របានបញ្ចូលប្រូតេអ៊ីន luciferase ទៅក្នុងឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាដែលបញ្ចេញពន្លឺដើម្បីជួយសម្រួលដល់ការសង្កេតនៅពេលពួកគេស្វែងរកគោលដៅ។ខណៈពេលដែលវាធ្វើឱ្យឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាទាំងនេះល្អសម្រាប់ការរកឃើញចំណុចនៃការថែទាំ ប៉ុន្តែបច្ចុប្បន្នពួកវាខ្វះភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ដែលត្រូវការសម្រាប់ការធ្វើតេស្តរោគវិនិច្ឆ័យ។ខណៈពេលដែលវិធីសាស្ត្រកែសម្រួលហ្សែន CRISPR អាចផ្តល់នូវសមត្ថភាពនេះ វាទាមទារជំហានជាច្រើន និងឧបករណ៍ឯកទេសបន្ថែមដើម្បីរកមើលសញ្ញាខ្សោយដែលអាចមានវត្តមាននៅក្នុងសំណាកដែលស្មុគស្មាញ និងគ្មានសំឡេង។
អ្នកស្រាវជ្រាវបានរកឃើញវិធីមួយដើម្បីបញ្ចូលគ្នានូវប្រូតេអ៊ីនដែលទាក់ទងនឹង CRISPR ជាមួយនឹងសញ្ញា bioluminescent ដែលអាចត្រូវបានរកឃើញជាមួយនឹងកាមេរ៉ាឌីជីថលសាមញ្ញ។ដើម្បីធ្វើឱ្យប្រាកដថាមានគំរូ RNA ឬ DNA គ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ការវិភាគ អ្នកស្រាវជ្រាវបានអនុវត្ត recombinase polymerase amplification (RPA) ដែលជាបច្ចេកទេសសាមញ្ញដែលដំណើរការនៅសីតុណ្ហភាពថេរប្រហែល 100 ° F ។ពួកគេបានបង្កើតវេទិកាថ្មីមួយដែលមានឈ្មោះថា Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) ដែលប្រូតេអ៊ីន CRISPR/Cas9 ទាំងពីរមានលក្ខណៈជាក់លាក់សម្រាប់ផ្នែកជាប់គ្នានៃហ្សែនមេរោគ ដែលនីមួយៗមានបំណែក luciferase តែមួយគត់ដែលភ្ជាប់ទៅនឹងពួកវាខាងលើ។
នៅពេលដែលហ្សែនមេរោគជាក់លាក់ដែលអ្នកស៊ើបអង្កេតកំពុងពិនិត្យមានវត្តមាន ប្រូតេអ៊ីន CRISPR/Cas9 ពីរភ្ជាប់ទៅនឹងលំដាប់អាស៊ីត nucleic គោលដៅ។ពួកវាស្ថិតនៅជិតគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យប្រូតេអ៊ីន luciferase មិនស្ថិតស្ថេរបង្កើត និងបញ្ចេញពន្លឺពណ៌ខៀវនៅក្នុងវត្តមាននៃស្រទាប់ខាងក្រោមគីមី។.ដើម្បីគណនាស្រទាប់ខាងក្រោមដែលប្រើប្រាស់ក្នុងដំណើរការនេះ អ្នកស្រាវជ្រាវបានប្រើប្រតិកម្មគ្រប់គ្រងដែលបញ្ចេញពន្លឺពណ៌បៃតង។បំពង់ដែលផ្លាស់ប្តូរពណ៌ពីបៃតងទៅខៀវបង្ហាញពីលទ្ធផលវិជ្ជមាន។
អ្នកស្រាវជ្រាវបានសាកល្បងវេទិការបស់ពួកគេដោយបង្កើត RPA-LUNAS assay ដែលរកឃើញSARS-CoV-2 RNAដោយគ្មានភាពឯកោ RNA គួរឱ្យធុញទ្រាន់ និងបានបង្ហាញពីដំណើរការវិនិច្ឆ័យរបស់វាលើសំណាករន្ធច្រមុះពីCOVID 19អ្នកជំងឺ។RPA-LUNAS បានរកឃើញដោយជោគជ័យនូវ SARS-CoV-2 ក្នុងរយៈពេល 20 នាទីនៅក្នុងគំរូដែលមានផ្ទុកមេរោគ RNA ទាបរហូតដល់ 200 ច្បាប់ចម្លង/μL។
អ្នកស្រាវជ្រាវជឿថា ការវិភាគរបស់ពួកគេអាចរកឃើញមេរោគផ្សេងៗបានយ៉ាងងាយស្រួល និងមានប្រសិទ្ធភាព។ពួកគេបានសរសេរថា "RPA-LUNAS មានភាពទាក់ទាញសម្រាប់ការធ្វើតេស្តជំងឺឆ្លងតាមចំណុចថែទាំ"។